ADN mitocondrial secventiere

Analiza permite detectarea mutațiilor punctiforme, a delețiilor și variantelor heteroplasmice implicate în disfuncția lanțului respirator mitocondrial.

Termen de execuție*

45 zile lucrătoare

Despre ADN mitocondrial – secvențiere

ADN-ul mitocondrial (mtDNA) este un genom circular distinct de ADN-ul nuclear, moștenit aproape exclusiv pe linie maternă și implicat direct în producția de energie celulară (ATP) prin fosforilare oxidativă.

Testul de secvențiere mtDNA realizează analiza completă a genomului mitocondrial (aprox. 16.569 pb), incluzând genele implicate în complexele respiratorii I–V, ARN-urile de transfer și ARN-urile ribozomale mitocondriale.

Prin tehnologia NGS pot fi identificate atât variantele patogene, cât și gradul de heteroplasmie, parametru esențial pentru severitatea și expresia clinică a bolilor mitocondriale.

Afecțiuni sau simptome asociate

Testul este indicat în investigarea cauzelor genetice pentru:

• encefalopatii mitocondriale
• miopatii și fatigabilitate musculară severă
• neuropatii periferice de cauză genetică
• atrofie optică și tulburări de vedere de etiologie mitocondrială
• epilepsii farmacorezistente
• tulburări neurodegenerative cu debut precoce
• sindroame metabolice ereditare
• acidoză lactică persistentă
• afectare multisistemică inexplicabilă (neurologică, musculară și cardiacă)
• suspiciune de boală mitocondrială primară
• cazuri rămase fără diagnostic după efectuarea testelor genetice standard (WES, WGS sau paneluri NGS)

Cui se adresează

• pacienților cu suspiciune de boală mitocondrială
• copiilor cu întârziere de dezvoltare și afectare neuromusculară
• adulților cu fatigabilitate severă și simptome multisistemice
• pacienților cu epilepsii sau neuropatii fără cauză clară
• cazurilor clinice complexe, nerezolvate prin testare genetică standard
• familiilor cu istoric sugestiv de transmitere maternă

Metodologie de testare

• extracția ADN-ului din sânge periferic recoltat pe EDTA
• amplificare și secvențiere completă a genomului mitocondrial (~16.5 kb)
• tehnologie NGS (Next Generation Sequencing)
• acoperirea completă a genelor mitocondriale (MT-ND1–6, MT-CO1–3, MT-CYB, MT-ATP6/8 etc.)
• detectarea variantelor punctiforme (SNV – Single Nucleotide Variants)
• identificarea delețiilor și inserțiilor mitocondriale
• evaluarea heteroplasmiei (proporția ADN mutant/normal)
• analiză bioinformatică și interpretare clinică specializată

Beneficii și importanță clinică

• analiză completă a genomului mitocondrial
• identificarea cauzelor genetice ale bolilor mitocondriale primare
• detectarea variantelor heteroplasmice cu impact clinic
• ajută la diferențierea dintre bolile mitocondriale și alte cauze neuromusculare
• contribuie la diagnosticul etiologic în cazuri multisistemice complexe
• permite consilierea genetică familială pe linie maternă
• poate ghida managementul metabolic și monitorizarea pacientului

Particularități și limitări

• analizează exclusiv ADN-ul mitocondrial, nu ADN-ul nuclear
• unele deleții mari sau rearanjamente complexe pot necesita metode suplimentare
• interpretarea variantelor depinde de gradul de heteroplasmie și de contextul clinic
• pot exista variante cu semnificație incertă (VUS)
• nu acoperă cauzele non-mitocondriale ale simptomelor similare
• necesită corelare strictă cu date clinice și investigații metabolice

Tip probă și condiții de recoltare

Probă necesară: sânge integral recoltat pe EDTA – 2 × 6 ml

Condiții de recoltare:

• recoltare prin puncție venoasă în vacutainere cu EDTA
• transport conform protocolului laboratorului
• formular de consimțământ și fișă clinică obligatorii
• fără pregătire specială a pacientului

Analize asociate recomandate

• WES (Whole Exome Sequencing) – pentru excluderea cauzelor nucleare
• WGS (Whole Genome Sequencing) – evaluare genomică completă
• panel NGS pentru boli neuromusculare – pentru fenotipuri specifice
• teste metabolice (lactat, piruvat, CPK) – evaluare funcțională
• biopsie musculară (în cazuri selectate) – confirmare histologică