Analiza expansiunilor in gena DMPK - Distrofia miotonica Steinert (STEIN)

Analiza este recomandată în suspiciunea clinică de distrofie miotonică și are rol esențial în confirmarea diagnosticului molecular și consilierea genetică familială.

Termen de execuție*

35 zile lucrătoare

Despre analiza expansiunilor în gena DMPK (Steinert)

Distrofia miotonică de tip 1 este determinată de o expansiune anormală a repetițiilor CTG în regiunea necodantă a genei DMPK. Severitatea bolii este corelată cu numărul de repetiții, fenomen cunoscut ca „anticipație genetică”, în care expansiunile tind să crească de la o generație la alta.

Analiza moleculară utilizează frecvent PCR și TP-PCR (triplet repeat primed PCR), metodă care permite detectarea prezenței expansiunii chiar și în cazurile cu aleli foarte lungi, care nu pot fi caracterizate complet prin PCR standard.

Rezultatele permit clasificarea genetică în:

• alele normale
• alele cu număr intermediar de repetiții (zonă intermediară)
• alele cu expansiune patologică (>50 repetări CTG)

Afecțiuni sau simptome asociate

Testul este indicat în evaluarea:

• distrofiei miotonice tip 1 (Steinert)
• miotoniei clinice (dificultatea relaxării musculare)
• slăbiciunii musculare progresive (predominant distală)
• cataractei precoce bilaterale
• tulburărilor de conducere cardiacă (blocuri, aritmii)
• tulburărilor endocrine (hipogonadism, diabet)
• afectării gastrointestinale (disfagie, motilitate redusă)
• tulburărilor cognitive sau somnolenței excesive
• istoric familial de distrofie miotonică

Cui se adresează

• pacienților cu suspiciune clinică de distrofie miotonică tip 1
• pacienților cu miotonie sau slăbiciune musculară progresivă
• persoanelor cu cataractă precoce fără cauză evidentă
• pacienților cu tulburări cardiace de conducere sugestive
• familiilor cu istoric de boală Steinert
• rudelor de gradul I pentru evaluarea riscului genetic

Metodologie de testare

• extracția ADN-ului din sânge periferic recoltat pe EDTA
• amplificare prin PCR și TP-PCR (repeat-primed PCR)
• analiză a expansiunilor CTG din gena DMPK
• analiza fragmentelor prin electroforeză capilară
• detectarea alelelor normale, premutante și patologice
• estimare calitativă a prezenței expansiunii (și uneori semi-cantitativă)
• interpretare în corelație cu fenotipul clinic

Beneficii și importanță clinică

• confirmă diagnosticul molecular al distrofiei miotonice tip 1
• permite diferențierea de alte miopatii sau neuropatii
• ajută la evaluarea riscului familial și consilierea genetică
• identifică formele clasice și congenitale ale bolii
• contribuie la monitorizarea și managementul complicațiilor multisistemice
• oferă informații esențiale pentru planificarea familială
• permite un diagnostic precoce, înainte de apariția manifestărilor clinice complete

Particularități și limitări

• nu determină întotdeauna exact numărul total de repetări CTG (mai ales în expansiuni mari)
• poate fi necesară confirmarea prin metode complementare în cazuri complexe
• nu exclude complet alte forme rare de distrofii musculare dacă rezultatul este negativ
• necesită corelare clinică obligatorie
• pot exista cazuri de mozaicism sau rezultate dificil de interpretat
• testul este strict diagnostic, nu de screening populațional

Tip probă și condiții de recoltare

Probă necesară:

• sânge integral EDTA

Volum recomandat:

• 2 × 6 ml sânge periferic

Condiții de recoltare:

• recoltare prin puncție venoasă în vacutainere cu EDTA
• transport la 2–8°C conform instrucțiunilor laboratorului
• completarea consimțământului informat și a fișei clinice
• nu necesită pregătire specială a pacientului

Analize asociate recomandate

• Distrofie miotonică tip 2 (gena CNBP/ZNF9) – diagnostic diferențial
• Panel NGS boli neuromusculare ereditare
• EMG (electromiografie) – evaluare funcțională musculară
• ECG / Holter EKG – evaluare afectare cardiacă
• Ecografie cardiacă – screening cardiomiopatie asociată
• Test genetic familial – screening rude grad I