Detectia mutatiilor in gena BRAF – patologii diverse (5 mutatii in codonul 600: V600E/K/D/R/M) (tesut inclus in parafina)

Descriere generală

Gena BRAF codifică o serin/treonin kinază implicată în calea de semnalizare MAPK/ERK, responsabilă de reglarea:

• proliferării celulare;
• diferențierii și supraviețuirii celulare;
• angiogenezei;
• migrației și metastazării celulelor tumorale.

Mutațiile activatoare localizate în codonul 600 al exonului 15 determină activarea constitutivă a proteinei BRAF, favorizând dezvoltarea și progresia tumorală.

Aceste mutații sunt întâlnite în multiple tipuri de cancer și constituie biomarkeri moleculari utilizați pentru alegerea terapiei țintite și evaluarea prognosticului.

Afecțiuni sau simptome asociate

Testarea este recomandată în special în următoarele patologii:

• melanom malign;
• cancer colorectal;
• carcinom tiroidian papilar;
• carcinom tiroidian anaplazic;
• cancer pulmonar non-microcelular (NSCLC);
• glioame și alte tumori ale sistemului nervos central;
• histiocitoză cu celule Langerhans;
• alte tumori solide pentru care ghidurile terapeutice recomandă evaluarea statusului mutațional BRAF.

Cui se adresează

• pacienților diagnosticați cu tumori solide la care este indicată testarea BRAF;
• pacienților eligibili pentru terapii țintite anti-BRAF și/sau anti-MEK;
• pacienților cu boală avansată sau metastatică;
• cazurilor discutate în cadrul comisiilor oncologice multidisciplinare (Tumor Board);
• medicilor oncologi, anatomopatologi și geneticieni implicați în medicina personalizată.

Metodologie de testare

• extracția ADN-ului din țesut tumoral inclus în parafină (FFPE);
• evaluarea calității și cantității ADN;
• amplificare prin tehnologia Real-Time PCR;

detecția calitativă a mutațiilor:

• V600E;
• V600K;
• V600D;
• V600R;
• V600M;
• interpretarea rezultatului conform ghidurilor internaționale și corelarea cu tabloul clinic și histopatologic.

Beneficii și importanță clinică

• identifică pacienții eligibili pentru terapii țintite anti-BRAF;
• contribuie la alegerea tratamentului personalizat;
• completează profilul molecular al tumorii;
• susține medicina de precizie în oncologie;
• poate influența prognosticul și conduita terapeutică;
• contribuie la evitarea administrării unor terapii ineficiente la pacienții fără mutații BRAF V600;
• facilitează includerea pacienților în studii clinice atunci când este indicat.

Particularități și limitări

• detectează exclusiv mutațiile V600E, V600K, V600D, V600R și V600M;
• nu identifică mutațiile BRAF localizate în alte regiuni ale genei;
• nu detectează alte alterări moleculare implicate în tumorigeneză;
• calitatea rezultatului depinde de cantitatea și integritatea ADN-ului extras din proba FFPE;
• probele cu celularitate tumorală redusă sau ADN degradat pot genera rezultate neconcludente;
• un rezultat negativ nu exclude existența altor variante patogene ale genei BRAF sau a altor modificări moleculare relevante.

Tip de probă

• țesut tumoral inclus în parafină (bloc FFPE);
• secțiuni histologice necolorate (lame FFPE), conform cerințelor laboratorului.

Recoltare și condiții

• proba trebuie selectată de medicul anatomopatolog;
• se recomandă alegerea unei zone cu celularitate tumorală adecvată;
• se evită zonele cu necroză, fibroză sau infiltrat inflamator extensiv;
• procentul de celule tumorale trebuie să fie suficient pentru analiza moleculară.

Denumiri alternative

• Test mutații BRAF V600
• Detecție mutații BRAF prin Real-Time PCR
• Test molecular BRAF pentru tumori solide
• Biomarker BRAF pentru terapii țintite
• Test genetic somatic BRAF

Analize asociate recomandate

• Panel genetic somatic pentru tumori solide (NGS);
• Panel genetic pan-cancer;
• Analiza mutațiilor KRAS, NRAS și EGFR (în funcție de tipul tumorii);
• Determinarea expresiei PD-L1;
• Testare MSI (instabilitate microsatelitară);
• Analiza fuziunilor ALK, ROS1, RET și NTRK (unde este indicat);
• Examinare histopatologică și imunohistochimică;
• Consult oncologic și evaluare în cadrul Tumor Board.