Imunohistochimia (IHC) și biologia moleculară în medicina oncologică de precizie

Testarea imunohistochimică, alături de testările genetice specifice, vin în sprijinul pacientului oncologic în vederea individualizării terapiei. Progresele terapeutice în managementul cancerului din ultimii ani au condus la dezvoltarea unor molecule noi, administrate țintit în funcție de profilul imunohistochimic și molecular al pacientului, astfel că evaluarea și caracterizarea markerilor tumorali sunt instrumente extrem de importante ale medicinei oncologice de precizie.

Imunohistochimia (IHC) joacă un rol important în diagnosticul patologiei mamare, ajutând, în primă instanță, în diferențierea leziunilor tumorale de cele non-tumorale, astfel încât, în laboratorul nostru, utilizăm teste imunohistochimice, pentru:

Testele imunohistochimice se efectuează pe platforme automatizate Ventana Benchmark și DAKO Autostainer Link 48.

Testrile genetice în cancerul mamar se efectuează cu scop terapeutic, prognostic sau identificare a predispoziției genetice pentru cancerul mamar.

Sunt 2 tipuri de testări genetice în funcție de proba analizată:

1.Testări genetice somatice – din țesutul tumoral;

2.Testări genetice germinale – din sângele periferic și care au scopul de a identifica mutațiile ereditare asociate riscului de a dezvolta cancer de sân.

Testările genetice în cancerul de sân care se pot efectua în Clinica Sante sunt prezentate în tabelul de mai jos:

Clinica Sante dispune de teste imunohistochimice pentru diagnosticarea majorității patologiilor tumorale dermatologice.

Testele imunohistochimice disponibile, strict corelate cu aspectul histopatologic din colorația uzualăhematoxilină-eozină și interpretate în context clinic și dermatoscopic adecvat, ajută la depistarea proliferărilor tumorale, determinarea țesuturilor de origine și clasificarea acestora.

La nivelul pielii, vorbim despre tumori epiteliale, melanocitare, mezenchimale, limfoide și determinări secundare de la nivelul pielii sau de la nivelul altor sisteme și organe.

În tumorile melanocitare benigne, maligne sau cu potențial malign incert, se folosesc markeri pentru confirmare și clasificare (MelanA, HMB45, S100, p16, Ki67).

În tumorile epiteliale, se folosesc markeri pentru confirmare, determinarea celulelor de origine și încadrare tumorală (tumori de celule scuamoase – p63, p40, CK5/6, EMA; tumori de celule bazale BerEP4, CD10, CK34betaE12, BCL2; tumori din celulele neuroendocrine – CK20, panCK-AE1/AE3, Chromogranin, Synaptophyșin, CD56; tumori de anexe cutanate (glande sebacee, glande sudoripare, fir de păr) – mCEA, S100, p63, AR, CK7, CD34).

Tumorile mezenchimale necesită în special markeri pentru determinarea celulelor de origine și clasificareaacestora, dar și etiologia tumorii (tumori adipocitare – S100, p16; tumori musculare – SMA, Desmin, MyoD1; tumori vasculare – CD34, CD31, D2-40, HHV8; tumori de teacă nervoasă -S100, tumori fibroase, fibro-histiocitare, miofibroblastice – CD34, SMA, Desmin, CD10, CD68, CD99).

Tumorile/pseudotumorile limfoide cutanate necesită expertiză într-un centru de hematopatologie și teste imunohistochimice specifice, care se pot realiza prin intermediul clinicii noastre – serviciu externalizat contracost, fără decontare prin casa de asigurări.

Testările genetice din țesutul tumoral identifică mutații somatice, mutații care apar strict la nivel tumorii și au scop terapeutic și prognostic. Aproximativ 50-60% din melanoame prezintă mutații la nivelul genei BRAF. Terapia țintintă anti-BRAF a revoluționat managementul melanoamelor metastatice BRAF-V600 pozitive.

Alte mutații somatice oncogenice în melanomul cutanat sunt în gena NRAS și KIT.

În Clinica Sante, pot fi efectuate aceste testări:

În melanomul uveal, dispunem de testarea FISH pentru statusul cromozomului 3, monosomia 3 fiind asociatăcu prognostic nefavorabil și potențial metastatic.

Un grup mic de pacienți sunt predispuși genetic la tumori de piele. Cele mai comune sindroame genetice asociate cu cancerul de piele:

Sindroamele asociate cu predispoziție la cancerul de piele pot fi identificate prin analiza mutațiilor germinale (testare din sânge) în cadrul unei testări genetice extinse:

Ca în orice altă patologie, în special tumorală, și în patologia pulmonară/pleuro-pulmonară, testele imunohistochimice (utilizând anticorpi specifici) au un rol critic în stabilirea unui diagnostic histopatologic corect, cu implicații majore în ceea ce privește prognosticul și conduita terapeutică, unele putând fi utilizate ca “unelte” de screening.

Trebuie însă avute în vedere limitările imunohistochimiei ca tehnică, atât de medicul anatomopatolog care interpretează rezultatele testării, cât și de medicul curant, dar și de pacient, aici incluzând și variabilitatea inter- și intraobservator a evaluării rezultatelor testelor imunhistochimice, precum și anumite condiții preanalitice necesare obținerii unor rezultate concludente.

Testele imunhistochimice trebuie interpretate de medici anatomopatologi cu experiență vastă și, bineînțeles, corelate cu aspectele histomorfologice identificate la examenul convențional (colorație hematoxilină-eozină +/- colorații speciale), precum și cu datele clinice și paraclinice.

Dintre avantajele imunohistochimiei, enumerăm: disponibilitatea extinsă, raportul cost-eficiență, rezultate rapide (“turn-around time”) și posibilitatea utilizării unui material tisular redus cantitativ, comparativ cu cel necesar altor tehnici diagnostice.

În patologia pulmonară/pleuro-pulmonară, imunohistochimia este cel mai frecvent utilizată în diagnosticul și caracterizarea imunofenotipică a leziunilor tumorale, cele non-neoplazice putând fi diagnosticate, în cea mai mare parte, printr-un examen histopatologic convențional atent realizat.

Astfel, în laboratorul nostru, se pot efectua teste imunohistochimice pentru:

– stabilirea caracterului primar sau secundar (metastatic) al neoplaziei, prin utilizarea unor panel-uri de anticorpi (ex. GATA3, Mammaglobin, GCDFP-15, receptori hormonali estrogenici și progesteronici pentru originea mamară a leziunii; GATA3, p63, CK7, CK20 pentru origine urotelială – rinichi, vezică urinară; PSA, PSMA pentru origine prostatică; PAX8, WT1, receptori hormonali, calretinin, InhibinA pentru origine la nivelul tractului genital feminin; CDX2, CK20, SATB2 pentru origine colo-rectală);

– stabilirea liniei/liniilor de diferențiere celulară la nivelul leziunii tumorale (epitelială – panel de citokeratine, EMA; mezenchimală – vimentin, CD10, desmin, actina musculară netedă, myogenin; melanocitară – S100, MelanA, HMB45; limfoidă – CD45/LCA, CD20, CD3, CD5, BCL2, BCL6);

– diagnosticul diferențial între adenocarcinomul pulmonar (în special cel cu arhitectură solidă) și carcinomul scuamos/scuamocelular (TTF1, Napsin A, p40, p63, CK5/6), cu precizarea aceasta – carcinoamele scuamoase prezintă un imunoprofil șimilar, indiferent de origine;

– diagnosticul diferențial între neoplaziile pulmonare și mezoteliomul malign (cu origine pleurală) – TTF1, Napsin A, BerEP4, WT1, D2-40, calretinin, GATA3;

– identificarea diferențierii neuroendocrine în neoplaziile pulmonare și încadrarea tumorilor neuroendocrine (ChromograninA, Synaptophyșin, CD56, Ki67, p53);

– confirmarea diagnosticului de carcinom cu celulă mică (“small cell carcinoma”) – prin evaluarea diferențierii neuroendocrine – având în vedere conduita terapeutică complet diferită de cea din carcinoamele non-microcelulare (NSCLC);

– diagnosticul diferențial (în unele cazuri problematice) între carcinomul cu celulă mică și neoplazii cu morfologie uneori relativ similară (carcinom scuamos bazaloid – p40, p63, ChromograninA, Synaptophysin, CD56; limfom – citokeratine, CD45);

– identificarea pacienților cu tumori pulmonare (carcinoame non-microcelulare) eligibili pentru terapii țintite (ex. inhibitori ALK, inhibitori de tirozin-kinază, inhibitori checkpoint), utilizând teste companion sau complementare (evaluare ALK în adenocarcinoamele pulmonare – clona D5F3 pe platforma automatizată Ventana Benchmark; evaluare PD-L1 – clona SP263 Ventana și, în curand, clona 22C3 DAKO – pe platforma automatizată Dako Autostainer Link 48).

Testările genetice utile în oncologia pulmonară/pleuro-pulmonară au ca scop ghidarea terapiei țintite/personalizate. Analizele genetice disponibile în Clinica Sante în cancerul pulmonar non-microcelular (NSCLC) sunt prezentate în tabelul de mai jos:

Abrevieri:

TKI- inhibitori tirozin-kinaza

cfDNA- ADN liber circulant

Clinica Sante dispune de teste imunohistochimice (IHC) pentru diagnosticarea majorității patologiilor tumorale și non-tumorale din întregul sistem digestiv (esofag, stomac, colon, intestin subțire, apendice, tract bilio-pancreatic, ficat).

Testele imunohistochimice (IHC) disponibile, strict corelate cu aspectul histopatologic din colorația uzuală hematoxilina-eozina și interpretate în context clinic și imagistic adecvat, ajută la depistarea proliferărilor tumorale, determinarea originii tumorilor, clasificarea și gradarea acestora, determinarea factorilor de prognostic și tratament.

La nivelul sistemului digestiv, se diagnostichează tumori benigne și maligne de origine epitelială sau mezenchimală, tumori neuroendocrine, tumori limfoide, tumori mixte și determinări secundare (metastaze) cu localizare digestivă – metastaze cu origine în sistemul digestiv sau din afara acestuia.

În patologia tumorală a sistemului digestiv, se folosesc combinații de markeri/anticorpi imunohistochimici (IHC) în funcție de localizarea tumorii investigate și in strictă corelație cu aspectul acesteia în colorația uzuală la examinarea la microscop.

În tumorile sistemului digestiv, se folosesc markeri/anticorpi imunohistochimici (IHC) pentru determinarea originii tumorale (SATB-2, CDX2, HepPar1/HSA), patogeneza tumorilor (MMR/Msi, p53, p16), clasificarea tumorilor (p63, p40, CK5/6, CK7, CK20, CK19, CDX2, SATB-2, EMA/MUC1, DOG-1, c-Kit/CD117, Synaptophyșin, Chromogranin, CD56, S100, SMA, Desmin, CD31, CD34, LCA/CD45, CD20, CD23, CD3, CD5, CD10, BCL-2, BCL-6, samd),  factori prognostici și de tratament (p53, MMR/Msi, Her2, Ki67 +/- PD-L1).

Testele imunohistochimice se efectuează pe platforme automatizate: Ventana Benchmark și Dako Autostainer 48.

Teste genetice utile în tumorile gastrointestinale se împart în:

În prima categorie de teste genetice, principalii markerii moleculari în cancerul colorectal (CRC) cu importanțăîn prognostic și decizia terapeutică sunt: EGFR, RAS (KRAS, NRAS), BRAF, Msi.

Analizele disponibile în Clinica Sante care analizează statusul mutațional în CRC sunt prezentate în tabelul de mai jos:

Analizele genetice importante în caracterizarea moleculară a cancerului de stomac și de joncțiune gastroesofagiana disponibile în Clinca Sante:

Analizele genetice importante în caracterizarea moleculară a tumorilor stromale gastrointerstinale (GIST) disponibile în Clinica Sante:

Analizele genetice importante în caracterizarea moleculară a cancerului pancreatic sunt testările care includ mutațiile BRCA1 și BRCA2, precum și instabilitatea microsatelitară (Msi), acestea având scopul ghidării terapiei țintite.

Pentru că mutațiile BRCA1 și BRCA2 pot fi constituționale, sunt necesare în anumite cazuri selecționate testarea acestora din sânge pentru stabilirea predispoziției la cancerul de sân/ovar/pancreas.

Aproximativ 5-10% dintre cancerele gastrointestinale sunt ereditare (moștenite). Cele mai importante sindroame de cancer de colon ereditar sunt sindromul Lynch (numit și Cancerul colorectal non-polipozic familial) și Polipomatoza adenomatoasă familială, dar și alte sindroame sunt descrise: sindrom Cowden, Polipoza asociată MYH, Cancerul gastric difuz ereditar, Polipoza familială juvenilă, sindromul Peutz-Jeghers.

Mutațiile asociate genelor implicate în cancerul gastrointestinal familial pot fi evaluate în cadrul unei analize extinse:

Clinica Sante dispune de teste imunohistochimice pentru diagnosticarea majorității patologiilor tumorale și non-tumorale din intregul tract genital feminin: anexe (ovare și trompe uterine/salpinge), uter (corp uterin și col uterin/cervix), vagin și vulvă.

Testele imunohistochimice disponibile, strict corelate cu aspectul histopatologic din colorația uzualăhematoxilină-eozină și interpretate în context clinic și imagistic adecvat, ajută la depistarea proliferărilor tumorale, determinarea originii tumorilor, clasificarea și gradarea acestora, determinarea factorilor de prognostic și tratament.

La nivelul tractului genital feminin, se diagnostichează tumori benigne și maligne de origine epitelială sau mezenchimală, tumori mixte, tumori de cordoane sexuale și tumori de celule germinale, determinari secundare cu localizare genitală – metastaze cu origine în tractul genital sau din afara acestuia.

În patologia ginecologică, se folosesc combinații de markeri în funcție de localizarea tumorii investigate microscopic și în strictă corelație cu aspectul acesteia în coloratia uzuală.

În tumorile epiteliale, se folosesc markeri pentru determinarea originii tumorale (PAX 8, ER, PR, p16, mCEA), patogeneză (p16, MMR/Msi, p53), clasificarea tumorilor sau a leziunilor premaligne (WT1, Vimentin, Napșin A, GATA 3, p16, p53, MMR/Msi, p63, p40, CK5/6, CK7, CK20, CDX2),  gradarea lor (p16, p53, Ki67), factori prognostici și de tratament (p53, MMR/Msi, ER, PR, HER2).

În tumorile mezenchimale, se folosesc preponderent markeri necesari clasificării tumorilor și determinarea țesuturilor de origine (Desmin, SMA, MyoD1, S100 , CD10, MelanA, HMB45).

În tumorile de cordoane sexuale și tumori de celule germinale, testele imunohistochimice ajută la încadrarea și clasificarea tumorilor (Calretinin, Inhibin, CD99, CD56, Melan A, WT1, Synaptophysin, Chromogranin, Thyreoglobulin, PAX8, TTF1).

Determinări secundare – metastaze de la nivelul altor organe sau infiltrări tumorale de la nivelul organelor învecinate.

Testările genetice somatice în tumorile ginecologice au valoare terapeutică și prognostică. Acestea sunt disponibile în Clinica Sante și sunt prezentate în tabelul de mai jos:

Testările genetice germinale sunt importante în stabilirea diagnosticului sindroamelor genetice asociate cu risc crescut tumoral în sfera ginecologică, dar și alte tipuri de cancer: sindromul Lynch și sindromului de cancer sân și ovar familial (ereditar) – HBOC (hereditary breast ovarian cancer syndrome).

*Abrevieri:

ER – receptor estrogen

PR – receptor progesteron

mCEA – antigen carcinoembrionar monoclonal

WT1 – “Wilms Tumor – 1”

MMR (mismatch repair genes)/ Msi – instabilitate microsatelitară

SMA – actina specifica muschiului neted

HMB45 – “human melanoma black”

TTF1 – factorul de transcriptie tiroidian-1

Clinica Sante dispune de teste imunohistochimice pentru diagnosticarea majorității patologiilor tumorale și non-tumorale din întregul tract urinar (rinichi, vezică urinară, prostată, uretră).

Testele imunohistochimice disponibile, strict corelate cu aspectul histopatologic din colorația uzuală hematoxilină-eozină și interpretate în context clinic și imagistic adecvat, ajută la depistarea proliferărilor tumorale, determinarea originii tumorilor, clasificarea și gradarea acestora, determinarea factorilor de prognostic și tratament.

La nivelul tractului urinar, se diagnostichează tumori benigne și maligne de origine epitelială sau mezenchimală, tumori neuroendocrine, tumori mixte și determinări secundare (metastaze) cu localizare urogenitală – metastaze cu origine în tractul urinar sau din afara acestuia.

În patologia tumorală a tractului urinar, se folosesc combinații de markeri/anticorpi imunohistochimici (IHC) în funcție de localizarea tumorii investigate și în stricta corelație cu aspectul acesteia în colorația uzuală la examinarea la microscop.

În tumorile tractului urinar, se folosesc markeri/anticorpi imunohistochimici (IHC) pentru determinarea originii tumorale (RCC, PAX-8, GATA-3, PSA/PSMA) sau clasificarea tumorilor (p63, CK7, CK20, CD10, c-Kit/CD117, Vimentin, AMACR/P504S, Synaptophyșin, Chromogranin, CD56, S100, SMA, Desmin, CD31, CD34, samd).

Testele imunohistochimice se efectuează pe platforme automatizate: Ventana Benchmark și Dako Autostainer 48

Testările genetice în cancerul de tract urinar

Numeroase trialuri clinice sunt în desfășurare pentru a identifica eficacitatea imunoterapiei asociată chimioterapiei în cancerul urotelial Msi+ astfel că testarea dMMR/Msi, alături de expresia PD-1 ar putea avea valoare predictivă pentru răspunsul la imunoterapia țintită PD-1.

În același timp, testarea instabilității microsatelitare poate fi utilizată pentru cancerul urotelial asociat sindromului Lynch (test de screening șindrom Lynch).

Sindromul Lynch este cauzat de mutații germinale în genele MMR și este asociat cu un risc semnificativ de a dezvolta în timpul vieții diverse tipuri de cancer: cancer colonic, cancer endometrial, cancer urotelial, cancer de stomac, cancer de ovar, cancer de pancreas, cancer de tract biliar. Pentru diagnosticul sindromului Lynch avem disponibilă analiza:

Ai aflat cât de importante sunt testele despre care am vorbit mai sus. Nu amâna grija pentru sănătatea ta!

Nu știi sigur ce test ți se potrivește? În anumite centre Clinica Sante poți beneficia de consultații genetice de specialitate, unde medicii noștri te pot ghida spre investigațiile potrivite pentru tine.

Alege în mod informat. Ai grijă de sănătatea ta!